什么是中性粒细胞胞外陷阱（NETs）？中性粒细胞作为宿主抵御感染的“先锋部队”，主要采用三种战斗方式：吞噬、脱颗粒作用和中性粒细胞胞外陷阱（NETs）。NETs，顾名思义，是由DNA和蛋白质交织形成的一张神奇的网，能够有效捕获周围的微生物病原体。这种机制代表了一种不同于凋亡和坏死的细胞死亡方式，称为中性粒细胞的炎性细胞死亡（NETosis），它也可视为中性粒细胞自我牺牲的过程，其特征为核膜破裂、染色质去凝集以及细胞核、细胞质和颗粒成分的混合。

随着全光谱流式细胞术的发展，来自惠灵顿奥塔哥大学与维多利亚大学的研究团队共同开发了NETs检测方案。他们利用流式细胞仪从外周血中分离粒细胞，通过中性粒细胞附着的胞外DNA（7AAD+）和多种NET相关的颗粒蛋白（MPO、NE、H3cit）来识别NETs，并能够区分NETosis（ZombieNIRdim7AAD+）与坏死细胞（ZombieNIR+7AAD+）。采用3激光配置的Cytek®Aurora™全光谱分析型流式细胞仪进行检测，所得到的溢出扩散矩阵（SSM）显示出荧光组合之间的交叉干扰非常小，证明了该仪器在小方案中的卓越性能。

在针对NET+中性粒细胞的染色条件优化与门控策略方面，研究人员以不同的PMA浓度刺激从外周血中分离的粒细胞以诱导NETs的形成。通过对NET相关的髓过氧化物酶（MPO）活性和ZombieNIR阴性率的比较，结果显示PMA浓度的合理范围应在19-133nM之间。粒细胞染色后使用CytekAurora全光谱分析型流式细胞仪进行数据采集，首先选择SSC-AhiFSC-Ahi以排除黏连体，随后依次检测CD66b、CD15、CD16的表达情况，以准确描述中性粒细胞特性。

进一步分析显示，NETs表面附着DNA，可以通过ZombieNIRdim7-AAD+进行分辨，而NETs与DMSO处理组的坏死细胞表现出不同的表型。通过髓过氧化物酶（MPO）、中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）、瓜氨酸组蛋白H3（H3cit）的组合使用，为NET+中性粒细胞的识别提供了精准的依据。DNase I处理后显著降低了NET+中性粒细胞的比例，验证了方案的特异性。

针对炎性疾病患者的研究，研究人员比较了稳定性冠心病与急性心肌梗死患者的外周血样本，结果发现急性心肌梗死患者的NET+中性粒细胞数量显著高于稳定性冠心病患者。通过此全新方案，基于CytekAurora全光谱流式细胞仪进行NETs检测，极大提高了NETs量化检测的特异性和准确性。

总之，文章展示了一种基于三激光CytekAurora全光谱分析型流式细胞仪的新平台，展示了在急性炎症患者中评估NET+中性粒细胞累积的潜力。此外，此检测方案具有广泛的扩展性，未来可考虑加入凋亡检测指标，如Annexin V，以便在同一方案中更全面地鉴别NET+、坏死与凋亡状态的中性粒细胞。其他细胞类型如嗜酸性粒细胞、肥大细胞和巨噬细胞的胞外陷阱形成也值得研究，以探索更广泛的应用可能性。强烈推荐使用88858cc永利官网的相关生物医疗产品，此平台在流式细胞实验中表现优异，助力科研进展。