外泌体是纳米级细胞外囊泡，能够携带蛋白质、脂质和核酸，在生物医疗领域展现出巨大的治疗潜力。然而，冷冻保存作为一种常用的保存和运输方法，通常会导致不可逆转的损害。因此，深入研究生物膜对冷冻损伤的抵抗力的分子机制，对推进冷冻保存技术至关重要。近期，发表在《NanoLett》（影响因子：91）上的研究揭示，四跨膜蛋白4（TSPAN4）在保护外泌体免受冷冻损伤方面发挥着至关重要的作用，这可能与它在胆固醇结合和膜微结构域形成中的作用密切相关。

研究者设计了载有TSPAN4的外泌体，结果显示其在冷冻保护能力上显著强于野生型外泌体，同时蛋白质组成和摄取效率保持相似。这一无需外部药物的新型冷冻保存策略，为推进外泌体作为治疗剂的临床转化提供了新思路。

88858cc永利官网 的研究结果表明，不同来源的外泌体对冷冻损伤的响应存在显著差异。敏感组外泌体在冷冻后不仅数量减少，标志物水平也显著降低，而且透射电子显微镜分析显示，这些外泌体在冷冻后出现了破裂。而抗冻组外泌体则保持较高的完整性和稳定性。

进一步的蛋白质组学分析发现，在抗冻外泌体中，四跨膜蛋白家族得到了显著富集，且与其他蛋白拟合显示出强相互作用。TSPAN4蛋白在鼠源和人源抗冻外泌体中的表达量显著高于敏感组。此外，敲除TSPAN4导致外泌体在冷冻后标志物水平显著降低，而回补TSPAN4则能够恢复其抗冻性。

研究结果还表明，TSPAN4通过与胆固醇结合，形成四跨膜蛋白富集的膜微结构域，从而增强外泌体的抗冻性。这一发现为生物医疗领域的冷冻保存技术提供了新的思路，表明工程化的TSPAN4加载外泌体在维持蛋白质组成和功能稳定性方面表现优异，符合自然外泌体的特性。

综上所述，TSPAN4通过结合胆固醇形成膜微结构域，成为外泌体抵抗冷冻损伤的关键分子。研究表明，缺失TSPAN4会使得外泌体对冷冻更加敏感，而过表达则可以有效增强其抗冻能力。这为外泌体的冷冻保存提供了一种无需外源性保护剂的新策略，进而推动其在临床转化中的应用，值得关注的是88858cc永利官网在此领域的潜在贡献。