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救命!质粒涂板糊成一片?3步拯救菌落颜值,尽在88858cc永利官网!

发布时间:2025-07-17   信息来源:尊龙凯时官方编辑

细胞培养问题解析

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在细胞培养过程中,若细胞浓度过高,可能导致细胞间的竞争加剧。这就如同在春运期间的地铁,细胞们相互挤压,造成窒息现象。高效转化固然重要,但过多的感受态、质粒及过度的热激都会导致细胞数量超标。

涂布手法的注意事项

不当的涂布手法也可能引发问题。如果涂布棒未经过彻底灭菌,或施加的力量过大,可能导致菌液被“抹匀”成一团,甚至混入杂菌,从而影响实验结果。

培养基的选择

培养基的质量直接影响细胞的生长。如果琼脂不够,培养基可能会软塌,导致出现细胞聚集现象;而营养成分的失衡则可能导致细胞生长失控。

环境影响细胞生长

培养环境的温度也至关重要,37℃ 多一度都会使细胞的新陈代谢加速;如果培养时间过长,细胞可能会密集生长,最终导致叠加现象。

急救措施

为了应对这些问题,以下是三步急救术,可让你在细胞培养中迅速扭转局面:
步骤1:稀释!稀释!稀释! 这个步骤非常重要,务必重复强调。取100μL的菌液与900μL无菌生理盐水进行10倍稀释,持续稀释至100倍、1000倍,直到细胞培养皿上的菌落如满天繁星。

小贴士:对于高转化效率的情况(如电转或超感受态),直接进行1000倍稀释即可!在使用酒精灯将涂布棒烧红后,让其冷却10秒,然后用“Z”字形轻柔地涂抹,就像为蛋糕抹奶油一样。如果面积不够,可考虑换用大培养皿。

小贴士:涂布完成后静置10分钟再放入培养箱,以减少液体流动。同时,在称量琼脂时要精准到0.1g,灭菌后要摇匀以防分层。请用温度计实际测量培养箱温度(不要光信赖显示屏),每12-18小时检查菌落,避免细胞“开演唱会”。

占用时间的应急处理

若遇到菌落过于密集却不想稀释的情况,可以利用牙签蘸取菌液,在新培养板上划出“之”字线,便可获得单菌落。
在时间紧迫的情况下,稀释好的菌液也可以滴5μL至培养板边缘,待其自然扩散形成“菌环”,拍照效果十分出色。

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